ABSTRACT
Los protones generadores en el interior de las células debido a la actividad, deben ser removidos mediante mecanismos activos del interior celular hacia el exterior. Uno de los sistemas encargados de transportar protones son las V-ATPasas que son complejos oligométricos presentes en la membranas de varias organelas subcelulares donde participan creando un gradiente de protones y un potencial que energiza dichas membranas. En las membranas plasmáticas del músculo liso de las vías aéreas describimos una V-ATPasas, componente de membranas, que expresa una actividad de Mg2+ ATPasas estimulada por el anión cloruro (Cl-). El efecto activador de cloruro no es específico de este anión sino que otros halógenos como son ioduro (I-) y el bromuro (Br-), la estimulan, con la exepción del fluoruro (F-). Esta ATPasas activada por Cl- es una nucleótido y no es capaz de hidrolizar nucleótidos difosfatos o monofosfatos. Los cationes divalentes activan en orden decreciente (Mg2+ > Mn2+ > Ca2+) a la Mg2+ - ATPasas activada por Cl-. Esta Mg2+ - ATPasas estimulada por Cl-, es insensible a la ouabaína, el vanadato, la azida de sodio y la rutaminina. La NEM (N-etilmaleimida) inhibió parcialmente la actividad de esta ATPsas pero el p-CMB (p-cloromercuribenzoato) produjo una fuerte inhibición de la actividad enzimática. La existencia de una H+ -ATPasas se demostró al estudiar el comportamiento de inhibidores específicos del transporte de protones. Así, la fuerte inhibición producida por la DCCD (diciclohexilcarbodiimida) indica la presencia de subunidad hidrofóbicas de un canal de protones. Adicionalmente, los protonóforos (1799 y FCCP), inducen un aumento en la actividad de Mg2+ - ATPasas estimulada por el cloruro, lo cual indica la presencia de una H+ ATPsas en estas membranas plasmáticas. El requerimiento del Cl- puede ser explicado por la existencia de un conductor de cloruro que funciona en paralelo con la bomba de protones (H+ - ATPasas tipo V), lo cual fue demostrado en este sistema debido al efecto inhibitorio de la duramicina. Las células del músculo liso de las vías aéreas no estan especializadas en la secreción de protones, pero dicha actividad al funcionar como una bomba primaria de protones, energizaría diversos movimientos de iones a través de la membrana plasmática como se ilustra en el modelo propuesto. Estos movimientos ionicos a su vez estan vínculados con fenómenos osmóticos relacionados con los procesos de la contracción del músculo liso de las aéreas